Комплект ForeDirect RT-qPCR
Описание на комплекта:
◮За РНК директно усилване в реално време от колекция от тампони без процеси на пречистване на РНК.Този комплект завършва qRT-PCR циклите в рамките на един час.Ензимната смес е оптимизирана смес от обратна транскриптаза, Hot-Start Taq ДНК полимераза, инхибитор на РНКаза.Реакционният буфер съдържа всички необходими компоненти, включително оптимизирани буферни компоненти, Mg2+, dUTP и dNTPs.
Описание
Комплектът ForeDirect RT-qPCR е предназначен за директно усилване на РНК в реално време от събрани тампони без процеси на пречистване на РНК.Този комплект завършва qRT-PCR циклите в рамките на един час.Ензимната смес е оптимизирана смес от обратна транскриптаза, Hot-Start Taq ДНК полимераза, инхибитор на РНКаза.Реакционният буфер съдържа всички необходими компоненти, включително оптимизирани буферни компоненти, Mg2+, dUTP и dNTPs.
Спецификации
100T
Компоненти на комплекта
| Агент за освобождаване на нуклеинова киселина |
| РНК протектор |
| 2 × RT-qPCR буфер |
| Ензимна смес (Taq&M-MLV) |
| Инструкции |
PCR приложение
1. След като PCR реакционните епруветки бъдат центрофугирани за кратко, поставете ги в резервоара за проба на инструмента за амплификация.
2. Термичен протокол
| стъпка | температура | време | Цикли | |
| 1 | Обратна транскрипция | 50 ℃ | 15 мин | 1 |
| 2 | Предварителна денатурация | 95 ℃ | 1 минута | 1 |
| 3 | Денатурация | 95 ℃ | 10 секунди | 42 |
| 4 | Отгряване/удължаване | 60 ℃ | 30 секунди | |
Забележка:Флуоресцентният сигнал се открива веднага след стъпката на удължаване на всеки цикъл.
3. След настройката запишете файла и стартирайте програмата за реакция.
Оперативни стъпки
Преди приготвянето на реагента, всички реагенти в комплекта трябва да се размразят при стайна температура и внимателно да се смесят.
Подготовка на реагента
1. Пригответе сместа за освобождаване на нуклеинова киселина
| Компонент | Обем на проба или контрола |
| Агент за освобождаване на нуклеинова киселина | 5μL |
| РНК протектор | 0,5 μL |
2. Пригответе реакционната смес
| Компонент | Обем на проба или контрола |
| 2 × RT-qPCR буфер | 15 μL |
| Ензимна смес (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Праймери и сонди | 1μL |
Съхранение и срок на годност
-Комплектът трябва да се съхранява при -20± 5℃.Срокът на валидност е 12 месеца.
-Избягвайте повтарящи се цикли на замразяване-размразяване (<5 цикъла).
