Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (без инструменти за вземане на проби) Протокол
Описание на комплекта:
Директно използване на животински тъканен лизат като шаблон за PCR амплификация, без отделна екстракция на ДНК, бърза и висока чувствителност.Добавена UNG система против замърсяване за елиминиране на фалшивите положителни резултати.
◮Не е необходимо времеемко и скъпо пречистване на ДНК.
◮Търсенето на проба е малко, просто вземете едно семе.
◮Не са необходими специални обработки като смилане и раздробяване и операцията е проста.
◮Оптимизираната PCR система позволява PCR да има по-висока специфичност и по-силна толерантност към инхибиторите на PCR реакцията.
Описания
Този комплект използва уникална буферна система за лизис за бързо освобождаване на геномна ДНК от проби от животински тъкани за PCR реакции, така че е особено подходящ за широкомащабни генетични тестове.
Процесът на освобождаване на геномна ДНК от лизисния буфер завършва в рамките на 10-30 минути при 65°C.Не са необходими други процеси като отстраняване на протеини и РНК и освободената следа от ДНК може да се използва като шаблон за PCR реакция.
2×PCR лесноTMMix (UNG) използва dUTP вместо dTTP на базата на 2×PCR EasyTMСмесва се и се добавя UNG ензим (урацил-N-гликозилаза), който може да разгради матрицата, съдържаща dUTP едновременно.Преди PCR реакцията UNG ензимът се използва за разграждане на PCR продукта, съдържащ урацил.UNG ензимът няма да има никакъв ефект върху шаблона, който не съдържа урацил, като по този начин се гарантира специфичността и точността на амплификацията и се предотвратява възможността за замърсяване на PCR продукти по време на широкомащабно генетично изследване.
D-Taq ДНК полимераза е ДНК полимераза, специално разработена от Foregene за директни PCR реакции.D-Taq ДНК полимеразата има силна толерантност към различни инхибитори на PCR реакцията и може ефективно да амплифицира следи от ДНК в различни сложни реакционни системи, а скоростта на амплификация може да достигне 2Kb/min, което е особено подходящо за директна PCR реакция.
Компоненти на комплекта
| Част I | Буфер AL |
| Foregene протеаза | |
| 6 × буфер за зареждане на ДНК | |
| Част II | 2×PCR лесноTMСмесване (UNG) |
Характеристики и предимства
■Без времеемко и скъпо пречистване на ДНК
■ Търсенето на проби е малко, могат да бъдат тествани само 5 mg животинска тъкан.
■ Не се изисква специална обработка като смилане и смачкване и операцията е проста.
■ Оптимизираната PCR система прави PCR по-висока специфичност и по-силна толерантност към инхибиторите на PCR реакцията.
■ PCR система против замърсяване 2×PCR лесноTMMix (UNG) ефективно елиминира замърсяването, причинено от PCR продукти и гарантира специфичността и точността на амплификацията.
Параметри на комплекта
Приложение: разнообразие от животински тъкани.
ДНК, освободена от лизис на пробата: използва се само като PCR шаблон.
Комплектът може да се използва за следните цели: идентифициране на трансгеноза, генотипиране на животни и др.
Работния процес
Съхранение и срок на годност
Част I от този комплект трябва да се съхранява на 2-8℃.
Реактивният буфер AL може да се съхранява 12 месеца при сухи условия;може да се съхранява на 2-8℃за по-дълго съхранение.
Reagent Foregene Protease има уникална формула.За да осигурите неговата активност и стабилност, моля, съхранявайте го на 4℃за 12 месеца.
Реагент 6×Буферът за зареждане на ДНК може да се съхранява на 4℃или -20℃за дълго време.
Част II от този комплект трябва да се съхранява при -20℃.
Реагент 2×PCR лесноTMСмесете (UNG), ако се използва често, може да се съхранява и на 4℃за краткосрочно съхранение (използване до 10 дни).
