Lnc-RT Heroᵀᴹ I (с gDNase) (супер премикс за синтез на cDNA на първа верига от lncRNA)
Спецификации
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (с gDNase) е система за обратна транскрипция, специално разработена за lncRNA за бързо отстраняване на геномно ДНК замърсяване.5×gDNase Mix може бързо да отстрани оставащия геном в РНК при 42°C за 2 минути, като ефективно избягва намесата на генома върху резултатите от qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix съдържа Foregene LncRNA обратна транскриптаза, специално разработена от Foregene, която е нов тип обратна транскриптаза, специално за lncRNA и други шаблони с дълги РНК комплекси, с по-силен афинитет на РНК и по-висока ефективност на обратния запис.Оптимизираната система прави скоростта на обратната транскрипция по-бърза и може лесно да транскрибира РНК шаблони с високо съдържание на GC и сложна вторична структура.Синтезът на първата верига на кДНК може да бъде завършен при 42°C за 15 минути.
Компоненти на комплекта
| 5× gDNase микс |
| 5× L-RT HeroTM микс |
| ddH2O без РНКаза |
| Инструкции |
Характеристики и предимства
■Ефективна способност за премахване на gDNA, която може да премахне gDNA в шаблона в рамките на 2 минути.
■ Може ефективно да обърне транскрипцията на lncRNA.Когато продуктът на обратната транскрипция е подложен на qPCR, стойността на Ct е по-ниска от тази на конвенционалната система за обратна транскрипция.
■ Ефективна система за обратна транскрипция, необходими са само 15 минути за завършване на синтеза на първата верига cDNA.
■ Комплексни шаблони: шаблони с високо GC съдържание и сложна вторична структура също могат да бъдат обърнати с висока ефективност.
■ Високочувствителна система за обратна транскрипция, шаблоните на ниво pg също могат да получат висококачествена cDNA.
■ Системата за обратна транскрипция има висока термична стабилност, оптималната реакционна температура е 42℃, и все още има добра производителност на обратна транскрипция при 50℃.
Приложение на комплекта
Относителен количествен анализ на lncRNA.
Абсолютен количествен анализ на lncRNA.
Той може бързо и точно да анализира следи от РНК като РНК вирус.
Обратна транскрипция на РНК шаблони с високо съдържание на GC или сложна вторична структура.
Работния процес
Съхранение и срок на годност
Комплектът трябва да се съхранява при -20°C. Съхранявайте продукта в хладилник с постоянна температура при -20°C веднага след получаване.Ако условията на съхранение са подходящи, продуктът няма да влоши работата си по време на 1-годишния период на валидност.
Ръководство за анализ на проблеми
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-специфично усилване
1. Неразумен дизайн на грунд
Препоръка: Проектирайте грундове според принципите на грундиране.
2. Геномни остатъци.
Предложение: Уверете се, че първата стъпка на реакционната температура на отстраняване на gDNA е 42°C и времето за реакция може също да бъде удължено до 5 минути.
Няма сигнал за усилване чрез RT-qPCR
1. РНК се разгражда.
Препоръка: Материалът за екстракция на РНК трябва да бъде възможно най-свеж и да се използва висококачествена и чиста РНК.
2. РНК съдържа инхибитори.
Препоръка: Инхибиторите на обратната транскрипция обикновено включват SDS, гуанидинови соли, EDTA и т.н. Препоръчва се РНК утайката да се промие със 70% етанол, за да се отстранят инхибиторите.
3. Проблеми с дизайна на грунд.
Препоръка: Съгласно принципа на проектиране на грунда, препроектирайте грундовете за проверка.
Целевата лента се появява в празната контрола
1. Замърсяване на работни инструменти или реактиви.
Препоръка: Всички реактиви или оборудване за експеримента трябва да бъдат автоклавирани.Бъдете внимателни и нежни, когато боравите, за да предотвратите засмукване на ДНК пробите в пипетата или изливане от центрофужната епруветка.
2. Възникнало е замърсяване по време на подготовката на PCR реакционната система.
Препоръка: Вземете необходимите предпазни мерки при работа, като например: носене на латексови ръкавици, използване на филтърни накрайници.Използвайте PCR микс в реално време в устойчива на замърсяване система.
3. Праймерите се разграждат.
Предложение: Използвайте SDS-PAGE електрофореза, за да откриете дали праймерите са се разградили и заменете с нови праймери за експерименти за откриване на флуоресценция.
Инструкция за употреба:
