• фейсбук
  • Linkedin
  • youtube
page_banner

Комплект за изолиране на пълна РНК в клетката Комплекти за пречистване на изолация на пълна РНК от клетка

Описание на комплекта:

Високо пречистена и висококачествена обща РНК може да бъде получена от различни култивирани клетки за 11 минути.

Без РНКаза

Работи при стайна температура (15-25 ℃)

С ДНК-почистваща колона

Висок добив на РНК

Бързо: Завършете екстракцията за 11 минути

Безопасност: Няма Органичен химикал

чужда сила


  • :
  • Подробности за продукта

    Продуктови етикети

    ЧЗВ

    Описание

    Този комплект използва въртящата се колона и формула, разработени от Foregene, които могат ефективно да извличат обща РНК с висока чистота и високо качество от клетки, култивирани в 96, 24, 12 и 6-ямкови плаки.

    Комплектът осигурява ефективна ДНК-почистваща колона, която може лесно да разделя супернатантата и клетъчния лизат, да свързва и премахва геномна ДНК.Операцията е проста и спестява време.

    TКолоната само за РНК може ефективно да свързва РНК с уникална формула.Могат да се обработват голям брой проби едновременно.

    Компоненти на комплекта

    Състав на комплекта RE-03111 RE-03114
    50 т 200 т
    Буфер cRL1* 25 мл 100 мл
    Буфер cRL2 15 мл 60 мл
    Буфер RW1* 25 мл 100 мл
    Буфер RW2 24 мл 96 мл
    ddH2O без РНКаза 10 мл 40 мл
    Колона само за РНК 50 200
    Колона за почистване на ДНК 50 200
    Инструкция 1 1

    *Моля, носете ръкавици и вземете предпазни мерки по време на операцията, тъй като Buffer cRL1 и Buffer RW1 съдържат дразнещи хаотропни соли.

    Характеристики и предимства

    ■ Целият процес се провежда при стайна температура (15-25 ℃), без ледена баня и центрофугиране при ниска температура.
    ■ Целият комплект не съдържа РНКаза, няма нужда да се притеснявате за разграждането на РНК.
    ■ DNA-Cleaning Column специфично свързва ДНК, така че комплектът да може да отстрани геномно ДНК замърсяване без добавяне на допълнителна ДНКаза.
    ■ Висок добив на РНК: Колоната само за РНК и уникалната формула могат ефективно да пречистят РНК.
    ■ Бърза скорост: лесна за работа и може да бъде завършена за 11 минути.
    ■ Безопасност: Не е необходим органичен реагент.
    ■ Високо качество: Пречистената РНК е с висока чистота, без протеини и други примеси и може да изпълни различни последващи експерименти.

    предимства на комплекта за изолиране на чужда РНК

    Приложение на комплекта

    Подходящ е за екстракция и пречистване на обща РНК от култивирани клетки в 96, 24, 12 и 6-ямкови плаки.

    Работния процес

    клетъчна обща РНК

    Диаграма

    Работен поток на комплекта за изолиране на обща клетъчна РНК1

    Диаграмата на батерията с агарозен гел на Cell Total RNA Isolation Kit третира горния различен брой клетки, 20 μl обемно елуиране, вземете 2 μl пречистена обща РНК 1%.

    Съхранение и срок на годност

    Комплектът може да се съхранява 12 месеца при стайна температура (15–25 ℃) или 2–8 ℃ за по-дълго време (24 месеца).

    Буферът cRL1 може да се съхранява при 4 ℃ за 1 месец след добавяне на 2-хидрокси-1-етантиол (по избор).


  • Предишен:
  • Следващия:

  • РНК не се екстрахира или добивите на РНК са ниски

    Често има различни фактори, които влияят на ефективността на възстановяването, като: съдържание на РНК в тъканна проба, метод на работа, обем на елуиране и др.

    1. По време на работа беше извършено центрофугиране в ледена баня или криогенно (4 °C).

    Препоръка: Работете при стайна температура (15-25 °C) през целия процес, без ледена баня и центрофуга при ниски температури.

    2. Неправилно съхранение на пробата или прекомерно дълго време за съхранение на пробата.

    Препоръка: Съхранявайте пробите при -80 °C или замразявайте в течен азот и избягвайте многократно използване при замразяване-размразяване;опитайте се да използвате прясна тъкан или култивирани клетки за екстракция на РНК.

    3. Недостатъчен лизис на пробата.

    Препоръка: Когато хомогенизирате тъкан, уверете се, че тъканта е достатъчно хомогенизирана и че тъканните клетки са достатъчно разделени, за да се обясни освобождаването на РНК.

    4. Елуентът не е добавен правилно.

    Препоръка: Потвърдете, че ddH без РНКаза2O се добавя на капки към средата на мембраната на колоната за пречистване.

    5. Правилният обем абсолютен етанол не е добавен към буфер RL2 или буфер RW2.

    Препоръка: Следвайте инструкциите, добавете правилния обем абсолютен етанол към буфер RL2 и буфер RW2 и разбъркайте добре преди да използвате комплекта.

    6. Дозировката на тъканната проба не е подходяща.

    Препоръка: Използвайте 10-20 mg тъкан или (1-5) × 106клетки на 500 μl буфер RL1, тъй като прекомерната употреба на тъкан може да доведе до намалена екстракция на РНК.

    7. Неправилен обем на елуиране или непълно елуиране.

    Препоръка: Обемът на елуиране на колоната за пречистване е 50-200 μl;ако ефектът на елуиране не е задоволителен, се препоръчва да се удължи времето за поставяне при стайна температура след добавяне на предварително загрят ddH без РНКаза2O, например за 5-10 минути.

    8. Колоната за пречистване има остатък от етанол след промиване с буфер RW2.

    Препоръка: Ако има остатък от етанол след промиване с буфер RW2, центрофугиране на празна епруветка за 1 минута, времето за операция на центрофугиране на празна епруветка може да се увеличи до 2 минути или колоната за пречистване може да се постави на стайна температура за 5 минути, за да се отстрани адекватно остатъчният етанол.

    Пречистената РНК се разгражда

    Качеството на пречистената РНК е свързано с фактори като запазване на пробата, замърсяване с РНКаза и манипулация и др.

    1. Тъканните проби не се съхраняват навреме.

    Препоръка: Ако тъканни проби или клетки не се използват своевременно след вземането им, незабавно криоконсервирайте при -80 °C или течен азот.За да извлечете РНК, използвайте нововзета проба от тъкан или клетка, когато е възможно.

    2. Многократно замразяване-размразяване на тъканни проби.

    Препоръка: Когато съхранявате тъканни проби, най-добре е да ги нарежете на малки парчета за консервиране и да премахнете едно от парчетата, когато ги използвате, за да избегнете повторно замразяване-размразяване на пробата и разграждането на РНК.

    3. РНКаза се въвежда или не се носят еднократни ръкавици, маски и др. по време на операцията.

    Препоръка: Експериментите за екстракция на РНК се извършват най-добре в отделни стаи за манипулиране на РНК и масата се изчиства преди експеримента.

    Носете ръкавици и маски за еднократна употреба по време на експеримента, за да сведете до минимум разграждането на РНК, причинено от въвеждането на РНКаза.

    4. Реагентите са замърсени с РНКаза по време на употреба.

    Препоръка: Заменете с нов комплект за изолиране на обща РНК от животни за свързани експерименти.

    5. Центрофужните епруветки, накрайници и т.н., използвани при манипулиране на РНК, са замърсени с РНКаза.

    Препоръка: Уверете се, че всички центрофужни епруветки, накрайници, пипети и др., използвани при екстракцията на РНК, не съдържат РНКаза.

    Пречистената получена РНК влияе върху експериментите надолу по веригата

    РНК, пречистена от колоната за пречистване, ако солните йони, съдържанието на протеин е твърде голямо, ще повлияе на експеримента надолу по веригата, като например: обратна транскрипция, Northern Blot et al.

    1. Елуираната РНК има остатъци от солни йони.

    Препоръка: Потвърдете, че правилният обем етанол е добавен към буфер RW2 и извършете 2 промивки на пречистващата колона при центробежната скорост, посочена за работа;ако има някакъв остатък от солеви йони, оставете колоната за пречистване на буфер RW2 за 5 минути при стайна температура и извършете центрофугиране, за да увеличите максимално отстраняването на замърсяването със сол.

    2. Етанолов остатък в елуирана РНК.

    Препоръка: Уверете се, че след промиване на буфер RW2 извършете операцията по центрофугиране на празна епруветка при скоростта на центрофугиране, указана за работа, увеличете времето на операцията по центрофугиране на празната епруветка до 2 минути, ако все още има остатък от етанол, или я оставете на стайна температура за 5 m

    Напишете вашето съобщение тук и ни го изпратете