QuickEasyᵀᴹ PCR комплект в реално време-Taqman
Описания
2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman, предоставен от QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit е система за мастър микс от ново поколение, предназначена за реакция на PCR амплификация в реално време с помощта на специфични флуоресцентни сонди.Неговата основна Foregene HS Taq ДНК полимераза се основава на модификация на антитела, използвана във връзка с допълнително оптимизирана PCR система на Foregene, има по-висока специфичност и ефективност на амплификация.В сравнение с обикновената PCR смес, тя има по-силна способност за усилване и по-нисък процент на несъответствие.Може да се използва при флуоресцентна количествена PCR реакция за намаляване на неспецифичната амплификация и подобряване на точността на PCR.Може значително да подобри специфичността на продукта и чувствителността на реакцията.В същото време ROX беше предоставен като вътрешно еталонно багрило.
QuickEasyTMКомплектът PCR в реално време-Taqman има широк обхват на приложение за количеството шаблон и може да получи добра стандартна крива в различни количествени региони и може точно да определи количествено и да открие целевите гени с добра повторяемост и висока степен на сигурност.
Спецификации
200 подготовка,500 Preps,1000 Preps,2000 Preps
Компоненти на комплекта
QuickEasyTMPCR комплект в реално време-Taqman(20μlсистема) | ||||
Съдържание на комплекта | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Preps | 500 Preps | 1000 Preps | 2000 Preps | |
2×бързолесноTM Истински PCR Разбъркайте-Такман | 1 мл×2 | 1,7 мл×3 | 1,7 мл×6 | 1,7 мл×12 |
20×ROX еталонно багрило | 200μL | 0,5 мл | 1 мл | 1 мл×2 |
Без ДНКаза ddH2O | 1,7 мл | 1,7 мл×2 | 10 мл | 20 мл |
IFU | 1парче | 1парче | 1парче | 1парче |
Характеристики и предимства
■ Уникалната система за PCR оптимизация прави 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman по-съвместим.
■ Foregene HS Taq Polymerase с горещ старт има по-висока ефективност на усилване, по-висока чувствителност на усилване и по-висока специфичност на усилване.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman използва уникална система, оптимизирана от Foregene за подобряване на чувствителността и специфичността на откриването на специфична за последователността сонда, която може да се използва за генотипиране и определяне на вариацията на броя на копията и получаване на точни резултати.
■ Този продукт се предлага с вътрешно референтно багрило ROX, което може да се използва за елиминиране на фона на сигнала и грешката на сигнала между ямките, което е удобно за клиентите да използват в различни видове количествени PCR инструменти.
Приложение на комплекта
■ Флуоресцентна количествена PCR за количествен анализ на шаблона;
■ Вконвенционална PCR амплификация;
■ Може да се използва за откриване на алели.
Съхранение и срок на годност
Комплектът трябва да се съхранява при -20°C на тъмно;ако се използва често, може да се съхранява и при 4°C за кратък период от време (използва се в рамките на 10 дни).
Принципи на проектиране на праймер за PCR в реално време
Преден грунд и обратен грунд
За PCR в реално време дизайнът на праймера е много важен.Праймерите са свързани със спецификата и ефективността на PCR амплификацията и могат да бъдат проектирани с позоваване на следните принципи:
Дължина на грунда: 18-30 bp.
GC съдържание: 40-60%.
Стойност на Tm: Софтуерът за проектиране на праймер, като Primer 5, може да даде стойността на Tm на праймера.Стойностите на Tm на праймерите нагоре и надолу по веригата трябва да бъдат възможно най-близки.Може да се използва и формулата за изчисление на Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Когато се извършва PCR, температура под стойността на Tm на праймера от 5 °C обикновено се избира като температура на отгряване (съответното повишаване на температурата на отгряване може да увеличи специфичността на PCR реакцията).
Праймери и PCR продукти:
Дължината на продукта за PCR амплификация на праймер за проектиране е за предпочитане 100-150 bp.
Грундовете за проектиране във вторичната структурна област на шаблона трябва да се избягват, доколкото е възможно.
Избягвайте образуването на 2 или повече комплементарни бази между 3' краищата на праймерите нагоре и надолу по веригата.
Терминалната основа на праймер 3' не може да присъства с 3 допълнителни последователни G или C.
Самите праймери не могат да имат комплементарни структури, в противен случай ще се образува структура на фиби, засягаща PCR амплификацията.
ATCG трябва да бъде разпределен възможно най-равномерно в последователността на праймера и 3' терминалната база трябва да се избягва, тъй като T.
Приложение 1:Допълнителен пакет от компоненти Cell Direct RT-qPCR Kit
1.Разтвор за клетъчен лизис
| |||
Компоненти на комплекта (24-ямкова лизираща система/ямка) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 т | 500 т | ||
Частаз | Буфер CL | 20 мл | 100 мл |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Буфер ST | 1 ml × 2 | 10 мл | |
ЧастII | ДНК изтривач | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT микс
| |
Компоненти на комплекта (20 μl реакционна система) | DRT-01011-B1 |
200 т | |
5× Директен RT микс | 800 μl |
ddH без РНКаза2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Компоненти на комплекта (20 μl реакционна система) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 т | 1000 т | |
2× Директен qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50 × ROX референтна боя | 40 μl | 200 μl |
ddH без РНКаза2O | 1,7 мл | 10 мл |