PCR методите и аерозолното замърсяване с нуклеинови киселини в лабораториите за тестване на нуклеинови киселини са като двете страни на една монета.Можем само да изберем да го имаме или не, но не можем да изберем дали да го искаме или да го харчим.

1. Скрининг на средство за отстраняване на ДНК

За да се постигне пространствено отстраняване на аерозолно замърсяване с нуклеинови киселини, първо е необходимо да се отсеят средствата за отстраняване на ДНК, които могат да премахнат нуклеиновите киселини в течно състояние.Тъй като няма много средства за отстраняване на ДНК, които наистина работят.За експерименталния метод, моля, вижте: DNA remover не може да бъде "тайно кътче" на лабораторията!

В този експеримент 100 копия/μL (CT приблизително 31) от ASFV плазмид и средство за отстраняване на ДНК, количествено определени чрез дигитален PCR, се смесват в равни обеми и след това реагират при стайна температура съответно за 10 минути, 20 минути и 30 минути.След екстракция на нуклеинова киселина беше извършена qPCR амплификация.Сравнява се положителна контрола, смесена с плазмид и вода.Тъй като експериментът не е завършен по едно и също време, може да има известно отклонение между резултатите, но това не влияе на заключението на експеримента.Досега съм оценил 10 търговски продукта за отстраняване на ДНК.Само продукти № 1, № 6 и № 8 могат ефективно да разграждат плазмидна ДНК в течно състояние.Други продукти нямат почти никакъв ефект.

Таблица 1 Ефект на премахване на нуклеинови киселини на наличния в търговската мрежа препарат за отстраняване на ДНК

2. Експериментът с ефекта на отстраняване на ДНК на често използвани дезинфектанти

1. Скрининг на често използвани дезинфектанти

Има много видове дезинфектанти, които обикновено се използват в лабораториите: алдехиди, феноли, алкохоли, кватернерни амониеви соли, пероксиди, хлорни препарати и киселини и основи.Дезинфекционните ефекти на тези дезинфектанти върху микроорганизмите са напълно потвърдени чрез експерименти, но няма достатъчно експериментални данни за ефекта на разграждане на нуклеиновите киселини.Лабораториите за тестване на нуклеинови киселини се нуждаят от дезинфектант, който не само има добър дезинфекционен ефект върху микроорганизмите, но също така може да разгради ДНК.Резултатите от тестовете показват, че само два хлорни препарата от 84 дезинфектант и трихлоризоцианурова киселина и 1 М солна киселина отговарят на изискванията.Тъй като 1 М солна киселина е силно корозивна, се препоръчва хлорните препарати да се използват за изхвърляне на отпадъци в лабораториите за тестване на нуклеинова киселина.Въпреки това, хлорните препарати са корозивни за металите и не могат да се използват за дезинфекция на инструменти и оборудване.

Таблица 2 Ефекти на отстраняване на ДНК от различни видове дезинфектанти

2. Минималната ефективна концентрация на хлорни препарати

Дезинфектантите на основата на хлор имат силен ефект на разграждане на ДНК, но поради своята метална корозивност и дразнене, те могат да се използват за почистване на пода, неметални плотове, накрайници за накисване, центрофужни епруветки и други тестови елементи.

Съгласно „Нови технически насоки за епидемична дезинфекция при коронарна пневмония“: Замърсители (кръв на пациенти, секрети и повръщано) наличен хлор 5g/L-10g/L дезинфектант, съдържащ хлор;подовете, стените и повърхностите на предметите използват наличен хлор 1g/L Хлорен дезинфектант: дрехите, спалното бельо и други текстилни изделия първо се накисват в хлорен дезинфектант с 0,5g/L наличен хлор за 30 минути и след това се почистват както обикновено.

Таблица 3 Ефект на отстраняване на ДНК от различни концентрации на хлорен дезинфектант

Резултатите от теста показват, че: когато ефективната концентрация на хлор е по-голяма или равна на 1,2 g/L, дезинфектантът, съдържащ хлор, може напълно да разгради 100 копия/μL плазмид, когато се използва за 5 минути.Когато действа в продължение на 10 минути, 84 дезинфектанта с ефективна концентрация на хлор, по-голяма или равна на 0,6 g/L, може напълно да разгради 100 копия/μL плазмиди.

3. Експеримент за отстраняване на въздух, замърсен от аерозол на нуклеинова киселина

Как да почистим въздуха, замърсен от аерозоли от нуклеинова киселина?Повечето от мислите са да се създаде замърсена с аерозол среда и след това да се почисти, или да се почистят нуклеиновите киселини след замърсяване.За мен експеримент, който не може да бъде повторен и резултатите от експеримента не могат да бъдат количествено анализирани, е безсмислен, затова заимствах някои методи за дезинфекция на въздуха.Вижте „GB27948-2020 Общи изисквания за дезинфектанти за въздух“ и „Технически спецификации за дезинфекция“

1. Тестови материали

1.1 Препарат за премахване на ДНК: В този експеримент бяха избрани два налични в търговската мрежа средства за отстраняване на ДНК 6 и 8 в Таблица 1.

1.2 Тестван плазмид: Като се има предвид, че CT стойността на повечето лабораторни замърсявания ще бъде по-висока от 30, концентрацията на ASFV генния плазмид, използван този път, е около 100 копия/μL, а флуоресцентната количествена PCR CT е около 31,07.Добавете плазмида към флокирания памучен тампон и изсушете на въздух.

1.3 Тестови инструмент: Дезинфекционният инструмент Bilingkehan KVBOX, който е любезно подкрепен от Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., има отлични показатели за дезинфекция на въздуха с дезинфектант с водороден пероксид и може ефективно да убива спори и други микроорганизми.

1.4 Тестово пространство: затворен трансферен прозорец от около 0,1 кубически метра.

2. Метод на изпитване

Количеството дезинфектант, зададено на машината за дезинфекция, е 10 ml, а концентрацията е 100 ml/m3, което е много по-високо от "GB27948-2020 Общи изисквания за дезинфектанти за въздух": когато се използва дезинфекция с аерозолен спрей, количеството дезинфектант трябва да бъде ≤10 ml/m3