-
Авангард на откриването на лекарства: Насочване на РНК с малки молекули
МРНК ваксината на Pfizer за COVID отново разпали страстта към използването на рибонуклеинова киселина (РНК) като терапевтична цел.Насочването на РНК с малки молекули обаче е изключително предизвикателство.РНК има само четири градивни елемента: аденин (A), цитозин (C), гуанин (G) и урацил (U), който замества тимина...Прочетете още -
Какво представляват лекарствата с нуклеинова киселина?
„Лекарства с нуклеинова киселина“ използва „нуклеинова киселина“, която се отнася до вещества като ДНК и РНК, които контролират генетичната информация, като лекарства.Те позволяват насочване на молекули като иРНК и миРНК, които не могат да бъдат насочени с традиционните лекарства с ниско молекулно тегло и лекарства с антитела, и има g...Прочетете още -
Известен опит относно siRNA в RT-PCR
1. Основни познания (ако искате да видите експерименталната част, моля, прехвърлете директно към втората част) Като производна реакция на конвенционалната PCR, PCR в реално време основно следи промяната на количеството продукт на амплификация във всеки цикъл на PCR амплификация реакция в реално време чрез...Прочетете още -
RT-PCR експериментална реакционна система подробно обобщение на метода за оптимизиране
一、Повишете чувствителността на реакционната система: 1. Изолирайте висококачествена РНК: Успешният синтез на кДНК идва от висококачествена РНК.Висококачествената РНК трябва поне да бъде с пълна дължина и да не съдържа инхибитори на обратната транскриптаза като EDTA или SDS.Качеството на РНК определя максималната а...Прочетете още -
Пълен PCR праймер дизайн и PCR подробности
Основа на дизайна на буквара (99% проблеми могат да бъдат решени) 1. Дължина на буквара: Учебникът изисква 15-30 bp, обикновено около 20 bp.Действителното състояние е по-добре да бъде 18-24 bp, за да се гарантира специфичността, но колкото по-дълго, толкова по-добре, твърде дългият праймер също ще намали специфичността и ще намали добива.2. Първи...Прочетете още -
Предпазни мерки за qRT-PCR, съставени старателно от старши лекар
Всички говорят за принципа на qRT-PCR експеримента, дизайна на праймера, интерпретацията на резултатите и т.н., но мисля, че трябва да споделя с вас експерименталната работа на qRT-PCR.Малко е, но става въпрос за резултати.Преди да направим qRT-PCR, трябва да имаме ясно разбиране за нашите ...Прочетете още -
Предпазни мерки за RT-qPCR
RT-qPCR експериментът включва екстракция на РНК и оценка на качеството, обратна транскрипция и qPCR три стъпки, всяка стъпка има много предпазни мерки, които ще представим подробно по-долу.Ⅰ.Оценка на качеството на РНК В експеримента RT-qPCR, след завършване на екстракцията на РНК, ...Прочетете още -
Задълбочено въведение в PCR в реално време
1. Първоначално разбиране На този етап трябва да разберем някои понятия и терминология, за да избегнем допускането на грешки пред нашите възрастни, като например: В: Каква е разликата между RT-PCR, qPCR, PCR в реално време, и RT-PCR в реално време?Отговор: RT-PCR е PCR с обратна транскрипция (обратна т...Прочетете още -
PCR, множествена PCR, in situ PCR, обратна PCR, RT-PCR, qPCR(1)– PCR
PCR, множествена PCR, in situ PCR, обратна PCR, RT-PCR, qPCR(1)– PCR Ние ще сортираме концепциите, стъпките и подробностите за различни PCR Ⅰ.PCR полимеразна верижна реакция, наричана PCR, е молекулярна биологична технология, която се използва за уголемяване на специфични ДНК фрагменти.Може да се счита за...Прочетете още -
Експериментален принцип на qRT-PCR
RT-qPCR е разработен от обикновена PCR технология.Той добавя флуоресцентни химикали (флуоресцентни багрила или флуоресцентни сонди) към традиционната PCR реакционна система и открива процеса на отгряване и удължаване на PCR в реално време според техните различни луминесцентни механизми.Флуоресцентни знаци...Прочетете още -
RT-PCR експериментална реакционна система подробно обобщение на метода за оптимизиране
Ⅰ.Увеличете чувствителността на реакционната система: 1. Отделете висококачествена РНК: Успешният синтез на cDNA идва от висококачествена РНК.Висококачествената РНК трябва да осигури най-малко общо по-дълго и да не съдържа инхибитори, които не съдържат записващи ензими, като EDTA или SDS.Качеството...Прочетете още -
Как да се уверите в разумен диапазон от стойности на Ct за qPCR експерименти
Ct стойността е най-важната форма за представяне на резултатите от флуоресцентната количествена PCR.Използва се за изчисляване на разликите в генната експресия или броя на генните копия.И така, каква е стойността на Ct на количественото определяне на флуоресценцията, която се счита за разумна?Как да осигурим ефективния обхват на стойността на Ct?Какво е Ct...Прочетете още