Въведение:

РНК молекулите могат да взаимодействат широко с други биологични молекули, като протеини, ДНК и РНК, и по този начин съществуват в клетките и организмите под формата на макромолекулни комплекси.Сред тях комплексите РНК-протеин са съществуването и функцията на РНК Една от важните форми на.RNA pull-down е класически метод за скрининг и идентифициране на RNA молекули, особено на взаимодействащите протеини на lncRNA молекули, и е признат от повечето изследователи и международни авторитетни академични списания.Днес FORREGENE ще сподели с вас експерименталния принцип и техническия процес на изтегляне на РНК, може би ще можете да го използвате

1. Експерименталният принцип на технологията за изтегляне на РНК:

In vitro транскрипция и синтез на белязана с биотин целева lncRNA или lncRNA фрагменти (включително РНК фрагменти, използвани като положителни и отрицателни контроли) и инкубиране с клетъчни екстракти;използвайте закотвени с авидин магнитни перли за събиране на комплекси РНК-протеин или РНК-РНК. След щателно измиване комплексът се елуира.Ако откриете прицелната протеинова молекула, която взаимодейства с lncRNA, извършете протеинова електрофореза върху продукта с изтегляне на РНК, открийте прицелния протеин чрез оцветяване със сребро и отрежете гела за масова спектрометрия;също така директно извършване на Western blot проверка на падащия продукт;ако бъдат открити. За целевите молекули на РНК, които взаимодействат с lncRNA, продуктите на изтегляне на РНК се подлагат на екстракция на РНК и се извършва специфично qRT-PCR откриване.

2. Експериментален процес на технология за изтегляне на РНК:

3. Техническо обслужване за изтегляне на РНК на FOREGENE:

Клетъчна култура

Приготвяне на екстракт от тотален клетъчен/ядрен/плазмен протеин

Експеримент за изтегляне на РНК

SDS-PAGE електрофореза, сребърно оцветяване

Масспектрометрия и WB експерименти

Експериментален доклад

4. Експериментален случай

Следващата фигура показва резултатите от откриването на РНК на FJ Bio-Bio и SDS-PAGE електрофореза, в която червената стрелка маркира разликата:

Изследователската група на професор Song Xu от университета в Съчуан е натрупала 15 години дългосрочно натрупване в областта на изследванията на lncRNA.Foregene Bio и изследователската група на професор Song Xu си сътрудничиха, за да стартират технологията за изтегляне на РНК на lncRNA, която ще ви даде задоволителен резултат за вашия експеримент.