Ензимът Taq с горещ старт е широко използван.В сравнение с обикновената ДНК полимераза, ензимът Taq с горещ старт може ефективно да избегне някои неспецифични амплификации и образуването на праймерни димери и може ефективно да подобри степента на успех на амплификацията на целевия ген.Особено в областта на генетичното тестване, ензимът Taq с горещ старт е идентифициран като задължителен стандарт в индустрията и не трябва да се използва обикновена ДНК полимераза.Както може да се види от горното, Taq ензимите с горещ старт са широко използвани.В момента има много марки Taq ензими с горещ старт на вътрешния пазар, но няма много Taq ензими с горещ старт с високо качество.Изправени пред толкова много продукти с горещ старт Taq ензим, как да изберем?

1. Изберете ензима Taq с горещ старт с висока ефективност на усилване

Ефективността на PCR амплификация е тясно свързана с работата на ензима Taq.След оптимизиране на добра Taq ензимна реакционна система, ефективността на амплификацията е над 95%, а диапазонът на амплификация на първоначалното количество на матрицата е широк.Задоволително усилване може да се получи, когато съдържанието на целевия ген е ниско и не е лесно да бъдете отровени, когато количеството на шаблона е високо и експоненциалният период на усилване е дълъг.За ензима Taq с лоша производителност, дори ако реакционната система е била оптимизирана многократно, ефективността на усилване все още е по-малка от 90%, „S“ формата на кривата на усилване не е очевидна, наклонът е малък и кривата е плоска.Когато количеството шаблон е малко, то не може да бъде усилено, а когато количеството шаблон е високо, ефектът на усилване не е идеален.Следователно изборът на ДНК полимерази с висока ефективност на амплификация е от решаващо значение за успеха на PCR и qPCR.

2. Изберете ензим Taq с горещ старт със силна ензимна мощност

Ензимната сила на ензима Taq е свързана с ефективността на усилване.Като цяло, колкото по-силна е ензимната мощност на Taq ензима с горещ старт, толкова по-дълъг е експоненциалният период на растеж на PCR амплификацията, толкова по-типична е „S-образната“ крива, толкова по-висока е стойността на флуоресцентния сигнал и толкова по-подходящ за мултиплексно PCR откриване.Маркирани ДНК полимерази със слаба ензимна мощност обикновено могат да поддържат само 2-плекс реакции.Когато се правят 3-плексни реакции, кривата на усилване е ниска, стойността на флуоресцентния сигнал е ниска и няма типична крива на усилване, така че резултатите са трудни за преценка.

3. Изберете ензим Taq с горещ старт и висока чувствителност

Най-общо казано, ДНК полимеразата има висока ефективност на усилване и висока чувствителност, но има и несъответствия.Ако изобилието на целевия ген в пробата, която трябва да бъде амплифицирана, е ниско, препоръчва се да се тества чувствителността на амплификация на ензима Taq.Най-често срещаният метод за откриване е да се извърши 10-кратно или 5-кратно градиентно разреждане на целевия генен плазмиден фрагмент, да се извърши PCR откриване при по-ниско разреждане и да се избере Taq ензимът с горещ старт с по-висока чувствителност на откриване.

От горното може да се види, че изследователите трябва да избират според собствените си експериментални изисквания и условия за финансиране.Най-добре е да направите експеримент за усилване с градиентно разреждане, за да откриете ефективността на усилването и чувствителността на Taq ензима с горещ старт.

Пример за Foregene's Taq ДНК полимераза:

Foreasy HS Taq ДНК полимераза

Описание

Foreasy HS Taq DNA Polymerase е ДНК полимераза, експресирана в инженерни бактерии Escherichia coli чрез технология за генна рекомбинация.Ензимът е комбиниран с уникален реакционен буфер, който прави продукта силно устойчив и съвместим и може директно да използва лизата на пробата (система Foregene Lysis) като шаблон за реакции за откриване.

Приложение

Качествена PCR и количествена PCR детекция на пречистени шаблони и непречистени шаблони.

Контрол на качеството

1. Не е открита екзогенна нуклеазна активност

2. PCR метод за откриване на остатъчна геномна ДНК без приемник

3. Може ефективно да амплифицира гени с едно копие в човешкия геном

4. Съхранявайте на стайна температура за една седмица, без очевидни промени в активността

Подробности за продукта: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/