1：Сменете експерименталните консумативи навреме

Настройте (NTC) отрицателна контрола и я повторете много пъти.След като се установи, че в лабораторията има замърсяване с PCR продукт, сменете навреме всички експериментални консумативи.Като например: повторно разреждане и подготовка на праймерите, повторна стерилизация на върха на пипетата, EP тръба, ddH2O и т.н., замяна с нова пипета и временно наемане на други лаборатории за извършване на PCR експерименти.Замърсената лаборатория се вентилира и облъчва с ултравиолетови лъчи, докато замърсяването с PCR продукта бъде елиминирано, преди да се продължи с експеримента.

2：Удължаване на времето за излагане на UV лъчи

Струва си да се отбележи, че за да се премахне замърсяването с ДНК, редовното ултравиолетово облъчване трябва да се удължи с 2 часа от обикновено.Въпреки това, ефектът от ултравиолетовата радиация върху отстраняването на малки фрагменти (под 200 bp) от ДНК замърсяване все още не е добър.

Ултравиолетовата дължина на вълната (nm) обикновено е 254/300 nm и е достатъчна за облъчване в продължение на 30 минути.Трябва да се отбележи, че когато се избира UV за елиминиране на замърсяването на остатъчни PCR продукти, трябва да се вземе предвид дължината на PCR продукта и разпределението на базите в продуктовата последователност.UV облъчването е ефективно само за дълги фрагменти над 500 bp и има малък ефект върху къси фрагменти.

По време на UV облъчване, пиримидиновите бази в PCR продукта ще образуват димери.Тези димери могат да прекратят удължаването, но не всички пиримидини в ДНК веригата могат да образуват димери и UV лъчението също може да разруши димерите..Степента на образуване на димер зависи от дължината на UV вълната, вида на пиримидиновия димер и последователността на нуклеотидите, съседни на мястото на димера.Следователно, ако PCR амплифицираните фрагменти са малки, се препоръчва да се използва UNG анти-PCR система за замърсяване на продукта.

3：Често използвани чистачи на ДНК замърсяване

Аерозолите се генерират лесно, когато се добавят пипети, което е трудно да се избегне и ще се утаят бързо.Следователно несъмнено е добър избор да се използват често специални почистващи препарати за ДНК замърсяване, за да се предотврати разпространението на ДНК замърсяване.

4: Използвайте UNG система против замърсяване

След като замърсяването с PCR продукта бъде отстранено, лабораторията за изпитване може да използва UNG анти-PCR система за замърсяване с продукт, за да предотврати замърсяване с PCR продукт.В общите лаборатории можете да извършвате прости експериментални разделяния, стриктно да отделяте зоната с PCR продукта от други зони, да установявате определени лабораторни правила и разпоредби и да провеждате съответно обучение, за да предотвратите появата на замърсяване с PCR продукт.

Препоръки: Създаването на разумна PCR лаборатория, поддържането на добра среда за PCR, формулирането на стандартни оперативни процедури за PCR и култивирането на строга оперативна осведоменост на експериментаторите са ключовете за предотвратяване или намаляване на замърсяването от PCR експерименти.